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當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章

  • 2018

    11-30

    STR細(xì)胞鑒定意義導(dǎo)讀:新買到的細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)室傳了幾代的細(xì)胞,又或者儲(chǔ)存于超低溫冰箱幾年不用的細(xì)胞,被污染了么?鑒定正確么?用它做研究會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果么?沒有經(jīng)過相應(yīng)的細(xì)胞鑒定,使用了被污染的細(xì)胞,經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn),寫出一篇論文,但是結(jié)論被推翻,論文被召回,大量的時(shí)間、物力和人力被浪費(fèi),一切都要從頭再來。背景介紹應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的哺乳動(dòng)物細(xì)胞被錯(cuò)誤鑒定和交叉污染的問題,一直是一個(gè)普遍存在的突出問題。據(jù)統(tǒng)計(jì),國外實(shí)驗(yàn)室有20%左右的細(xì)胞株被錯(cuò)誤鑒定和交叉污染,NIH和ATCC近...

  • 2018

    11-28

    【技術(shù)文章】細(xì)胞養(yǎng)不好?這些注意事項(xiàng)請(qǐng)收好(三)1、購買的細(xì)胞死亡或存活率不佳可能原因?細(xì)胞冷凍管解凍后,為何會(huì)有細(xì)胞數(shù)目太少的情形?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于–80℃太久。研究人員在冷凍細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞...

  • 2018

    11-24

    一個(gè)好的ATCC細(xì)胞株有多方面要求:1.產(chǎn)量高,高的產(chǎn)量直接降低固定投資和單次生產(chǎn)成本。2.產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。產(chǎn)品質(zhì)量影響藥效和安全性。3.穩(wěn)定性。產(chǎn)量和質(zhì)量在生產(chǎn)傳代過程中不應(yīng)有大的改變。一般認(rèn)為在60-90PDL產(chǎn)量變化不超過30%是可以接受的。4.與生產(chǎn)過程的相容性。細(xì)胞株需要適合大規(guī)模生產(chǎn)放大。5.合規(guī)。ATCC細(xì)胞株的構(gòu)建過程應(yīng)避免接觸或使用動(dòng)物來源成分或其它可能影響安全性的成分,保證單克隆性(clonality)以及整個(gè)過程的實(shí)驗(yàn)記錄完整。ATCC細(xì)胞株無菌操作注...

  • 2018

    11-15

    貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞的都有哪些不同你都知道么一、貼壁生長的細(xì)胞核懸浮生長的細(xì)胞都有很多種?;铙w體內(nèi)的細(xì)胞當(dāng)離體置于體外培養(yǎng)時(shí)大多數(shù)均以貼壁方式生長,主要包括正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞,比如成纖維細(xì)胞,骨骼組織(骨及軟骨),心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,內(nèi)分泌細(xì)胞,黑色素細(xì)胞及各種腫瘤細(xì)胞等。少數(shù)細(xì)胞在體外培養(yǎng)是懸浮生長,包括一些取自血、脾或骨髓的培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是血液白細(xì)胞以及癌腫細(xì)胞。二、貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞在培養(yǎng)條件上的區(qū)別貼壁細(xì)胞要加血清,不貼壁的可以不加血清。三、...

  • 2018

    10-27

    病毒載體構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株有什么優(yōu)勢(shì)?化學(xué)試劑介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法和電轉(zhuǎn),整合率低,同時(shí)整合位點(diǎn)不穩(wěn)定,易發(fā)生再次丟失的情況,而且整合位點(diǎn)一般都在轉(zhuǎn)錄活躍區(qū)之外,所以并不是理想的穩(wěn)定整合工具。另外,整合后的拷貝數(shù)是由核內(nèi)的外源DNA局部濃度,而不是轉(zhuǎn)染時(shí)的DNA的量決定,而化學(xué)方法在輸入質(zhì)粒載體入核的效率比電轉(zhuǎn)和病毒載體相比要低得多,導(dǎo)致其轉(zhuǎn)染相同細(xì)胞所用質(zhì)粒載體用量要大大高于其它方法,造成入核質(zhì)粒載體量難以控制,這也解釋了為什么化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和其它兩種方比,更傾向于得到串聯(lián)多拷貝。以上...

  • 2018

    10-19

    ATCC細(xì)胞復(fù)蘇和培養(yǎng)*手冊(cè)細(xì)胞是我們很多基礎(chǔ)研究的基礎(chǔ),那么細(xì)胞能否被成功復(fù)蘇就尤為重要了。美國菌種保藏中心,又稱美國模式菌種收集中心(ATCC),是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的,非贏利性組織。目前它可以提供各種動(dòng)植物細(xì)胞、標(biāo)準(zhǔn)品、菌株達(dá)兩萬多種。以下是來自ATCC的*說明,小凳子搬起來。01收到細(xì)胞的注意事項(xiàng)凍存的ATCC細(xì)胞株和雜交瘤細(xì)胞株在運(yùn)送過程中使用干冰保持低溫。收到凍存細(xì)胞后,可以立即解凍復(fù)蘇,去除二甲基亞砜(DMSO)后進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。如果不立即復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞...

  • 2018

    9-28

    白血病細(xì)胞株來告訴你白血病的病因一、輻射損傷電離輻射致白血病作用已在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí),而對(duì)人類的致白血病作用也從以下的事實(shí)得到提示:早期不加防護(hù)的放射線工作者,其白血病發(fā)病率比一般醫(yī)生高8-9倍;強(qiáng)直性脊柱炎的患者采用放射性治療者,白血病發(fā)病率比一般人高10倍,日本的廣島和長畸原子彈爆炸后,遭受輻射地區(qū)與末遭輻射地區(qū)的居民之間的白血病發(fā)病率相差30倍。二、化學(xué)因素已知很多化學(xué)物質(zhì)有致白血病作用,如工業(yè)中廣泛應(yīng)用的苯。藥物中的抗癌劑(尤以烷化劑)、乙雙嗎啉、氯霉素、保泰松、安...

  • 2018

    9-26

    我國在腫瘤光動(dòng)力治療方面有重大進(jìn)展耐藥是導(dǎo)致腫瘤患者化療失敗的主要原因,是攻克癌癥的一項(xiàng)重大挑戰(zhàn)。光動(dòng)力治療(photodynamictherapy,PDT)可以利用光激發(fā)卟啉等光敏劑產(chǎn)生活性氧殺死腫瘤細(xì)胞,創(chuàng)傷小、毒性小、恢復(fù)快、可保護(hù)容貌,并且可利用光動(dòng)力熒光診斷檢測(cè)早期癌或癌前病變,具有無創(chuàng)、快速、客觀等特點(diǎn)。但是,單一的光動(dòng)力治療后,腫瘤容易復(fù)發(fā)。在國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃納米科技重點(diǎn)專項(xiàng)項(xiàng)目“基于納米分子影像探針的癌癥微創(chuàng)介入診療導(dǎo)航技術(shù)”的支持下,北京大學(xué)工學(xué)院戴志飛教授...

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